1．下列有关微生物培养基种类及配制原则的叙述，正确的是（ ）
A．任何培养基都必须含有碳源、氮源、水、无机盐及生长因子
B．液体培养基可用于观察菌落，固体培养基可用于工业生产
C．培养基制备时应调节 $ \mathrm{p}\mathrm{H} $ 至酸性，以保证细菌的正常生命活动
D．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到 $ \mathrm{p}\mathrm{H} $ 、 $ {\mathrm{O}}_{2} $ 、渗透压等的影响
培养基不一定必须含有碳源、氮源、生长因子，例如，自养微生物可利用 $ {\mathrm{C}\mathrm{O}}_{2} $ 作为碳源，固氮菌可利用空气中的氮气，而大肠杆菌培养基通常不需要额外添加生长因子， $ \mathrm{A} $ 错误；液体培养基可用于工业生产（如扩大培养），固体培养基可用于观察菌落， $ \mathrm{B} $ 错误；培养基的 $ \mathrm{p}\mathrm{H} $ 需要根据微生物种类调节， $ \mathrm{C} $ 错误；微生物生长受营养、 $ \mathrm{p}\mathrm{H} $ 、氧气（如好氧菌与厌氧菌）、渗透压（如高渗抑制）等多种因素影响， $ \mathrm{D} $ 正确。
2．无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。下列关于实验过程中微生物消毒、灭菌的叙述，错误的是（ ）
A．实验需要用到的培养基可以通过湿热灭菌法灭菌
B．倒平板后，对空白培养基进行培养，可检测培养基是否被污染
C．可用干热灭菌法对实验中所使用的培养皿、金属用具等进行灭菌
D．在接种箱或超净工作台的使用过程中，可用紫外线照射 $ 30 \min $ 进行消毒
湿热灭菌法是指利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法，实验需要用到的培养基可以通过湿热灭菌法灭菌， $ \mathrm{A} $ 正确；实验室中检测培养基是否被污染，一般是在倒平板后对空白培养基进行培养， $ \mathrm{B} $ 正确；对耐高温的和需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿等）、金属用具等，可以采用干热灭菌法灭菌， $ \mathrm{C} $ 正确；接种箱或超净工作台在使用前，可用紫外线照射 $ 30 \min $ 进行消毒， $ \mathrm{D} $ 错误。
3．在生产、生活和科研中，经常通过无菌技术避免杂菌的污染。下列叙述正确的是（ ）
A．通过消毒或灭菌，可杀死所有的微生物，包括孢子和芽孢
B．接种环、涂布器等接种用具的灭菌方式只有灼烧灭菌
C．为避免污染，接种等操作尽量在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行
D．对于牛奶等不耐高温的液体，一般采用紫外线照射法进行消毒
通过灭菌可以将所有的微生物，包括孢子和芽孢都杀死，而消毒只能杀死物体表面或内部一部分微生物， $ \mathrm{A} $ 错误；接种环、涂布器等接种用具的灭菌方式除了灼烧灭菌外，也可用干热灭菌， $ \mathrm{B} $ 错误；为避免杂菌污染，接种等操作尽量在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行，超净工作台台面在使用前可以用紫外线消毒 $ 30 \min $ ， $ \mathrm{C} $ 正确；对于一些不耐高温的液体，如牛奶，一般采用巴氏消毒法进行消毒， $ \mathrm{D} $ 错误。
4．平板划线法是一种常用的微生物分离纯化的方法，某研究小组进行了纯化酵母菌的实验，图1为其中一个操作环节，图2为平板划线示意图，下列叙述错误的是（ ）
图1 图2
A．划线操作应在超净工作台上进行
B．除第一次划线外，以后每一次划线的起点是上一次划线的末端
C．只有在第5次划线区域中才可以得到单菌落
D．若要完成图2操作，接种环至少需要经过6次灼烧灭菌
划线操作应在超净工作台上进行， $ \mathrm{A} $ 正确；除第一次划线外，以后每一次划线的起点是上一次划线的末端，目的是将聚集的菌种逐渐稀释分散，从而得到单菌落， $ \mathrm{B} $ 正确；有可能在第5次划线的区域获得单菌落，也有可能在第4次划线的区域就得到所需要的单菌落， $ \mathrm{C} $ 错误；接种前接种环要灼烧灭菌，每次划线后接种环也要灼烧灭菌，图2中有5次划线，故加上接种前的灼烧，接种环至少需要经过6次灼烧灭菌， $ \mathrm{D} $ 正确。
5．某兴趣小组利用平板划线法接种进行酵母菌的纯培养，部分操作和所得平板如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．操作①中待培养基冷却至室温后缓慢倒入培养皿，凝固后将其倒置
B．操作②灼烧接种环后，立即在酒精灯火焰附近用接种环蘸取菌液
C．完成平板划线后待菌液被培养基吸收后，再倒置放入恒温培养箱中培养
D．若③中有杂菌菌落，但④中无菌落，可能是因为培养基灭菌不彻底
操作①中培养基冷却至 $ 50℃ $ 左右时，在酒精灯火焰附近倒平板， $ \mathrm{A} $ 错误；操作②为平板划线操作，接种环灼烧后应在火焰旁冷却后再蘸取菌液，以防高温杀死酵母菌， $ \mathrm{B} $ 错误；完成平板划线后，待菌液被培养基吸收后，再将培养基倒置放入恒温培养箱中进行培养， $ \mathrm{C} $ 正确；若③中有杂菌菌落，④中无菌落，说明培养基灭菌是彻底的，杂菌可能来自接种过程， $ \mathrm{D} $ 错误。
1．瘤胃纤毛虫是一种能分泌纤维素酶的原生动物，生活在牛羊等反刍动物的瘤胃中。研究人员将纯化的瘤胃纤毛虫接种到含 $ 5\mathrm{m}\mathrm{L} $ 改良培养液（由 $ {\mathrm{K}}_{2}{\mathrm{H}\mathrm{P}\mathrm{O}}_{4} $ 、 $ {\mathrm{K}\mathrm{H}}_{2}{\mathrm{P}\mathrm{O}}_{4} $ 、 $ {\mathrm{M}\mathrm{g}\mathrm{S}\mathrm{O}}_{4} $ 、 $ \mathrm{N}\mathrm{a}\mathrm{C}\mathrm{l} $ 等组成）的试管中，每天投喂 $ 100\mu \mathrm{L} $ 底物悬液（由淀粉和草粉组成），每 $ 3～4 $ 天换液一次，投喂和换液结束后均充入某种气体再盖上盖子继续培养。每天进行计数，结果如图所示。相关叙述错误的是（ ）
A．可用干热灭菌法对改良培养液进行灭菌处理
B． $ {\mathrm{K}}_{2}{\mathrm{H}\mathrm{P}\mathrm{O}}_{4} $ 和 $ {\mathrm{K}\mathrm{H}}_{2}{\mathrm{P}\mathrm{O}}_{4} $ 共同作用能维持培养液的 $ \mathrm{p}\mathrm{H} $
C．投喂和换液结束后充入的可能是 $ {\mathrm{C}\mathrm{O}}_{2} $ ，其目的是提供无氧环境
D．将等量瘤胃纤毛虫接种到含 $ 10\mathrm{m}\mathrm{L} $ 改良培养液的试管中，其环境容纳量将上移
一般用湿热灭菌法对培养液进行灭菌， $ \mathrm{A} $ 错误； $ {\mathrm{K}}_{2}{\mathrm{H}\mathrm{P}\mathrm{O}}_{4} $ 和 $ {\mathrm{K}\mathrm{H}}_{2}{\mathrm{P}\mathrm{O}}_{4} $ 是缓冲物质，能维持培养液的 $ \mathrm{p}\mathrm{H} $ ， $ \mathrm{B} $ 正确；瘤胃纤毛虫生活在胃内，胃内为无氧环境，投喂和换液结束后可充入 $ {\mathrm{C}\mathrm{O}}_{2} $ ，其目的是提供无氧环境， $ \mathrm{C} $ 正确；将等量瘤胃纤毛虫接种到含 $ 10\mathrm{m}\mathrm{L} $ 改良培养液的试管中，与题干相比，增加了 $ 5\mathrm{m}\mathrm{L} $ 改良培养液，其环境容纳量将提高， $ \mathrm{D} $ 正确。
2．在培养基配制和微生物接种的过程中，需要确保无杂菌污染，进行无菌操作。图中符合无菌操作要求的有（ ）
A．①②③④
B．①②③⑤
C．①③④⑤
D．②③④⑤
酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为避免周围环境中的微生物污染，应将锥形瓶瓶口通过火焰，并在火焰旁将培养基倒入灭菌的培养皿中，要在酒精灯火焰附近接种，①⑤正确；盛菌种的试管管口通过酒精灯火焰，以防止杂菌污染，②正确；进行平板划线时，接种环在接种前要在火焰上灼烧，待冷却后进行接种，③正确；培养皿不能直接放在火焰上灼烧，④错误，故选 $ \mathrm{B} $ 。
3．有些蛋白质中含硫元素，在一些微生物的作用下，产生的硫化氢会引起水体发臭。为探究某发臭水体中的甲、乙菌能否产生硫化氢以及这两种菌的运动能力，研究人员采用穿刺接种法，分别将甲、乙菌接种在含有硫酸亚铁铵（与硫化氢结合产生黑色沉淀）的培养基中，如图所示。假设两种菌的繁殖速度相等，下列叙述错误的是（ ）
A．甲菌的运动能力比乙菌弱
B．甲菌和乙菌均可分解、利用硫化氢
C．两支试管中的培养基均不属于液体培养基
D．甲、乙菌在培养基内部生长，一定不是好氧菌
从图中可以看出，甲菌在试管中分布范围小于乙菌，说明了乙菌的运动能力比甲菌强， $ \mathrm{A} $ 正确；该实验只能证明甲、乙两种菌均能产生硫化氢，但不能说明甲菌和乙菌均可分解、利用硫化氢， $ \mathrm{B} $ 错误；本实验采用穿刺接种法，不能在液体培养基中进行，所以两支试管中的培养基均不是液体培养基， $ \mathrm{C} $ 正确；甲、乙菌在培养基内部缺氧的环境下生长，一定不是好氧菌， $ \mathrm{D} $ 正确。
4．以细菌为“颜料”、培养皿为“画布”的活体绘画艺术，也被称为微生物艺术。该艺术利用培养基培养有色微生物，并通过画笔的勾勒将其塑造成精妙图案，让科学与艺术在培养皿中翩然共舞。如图《微生物孔雀》在创作时使用了非致病性大肠杆菌的安全菌株。下列关于创作微生物艺术的操作过程，正确的是（ ）
A．创作细菌画，是一门优雅而危险的艺术，为防止污染，接种大肠杆菌后，对培养基要进行高压蒸汽灭菌处理，以确保细菌被彻底灭活
B．上述作品的培养基应该在灭菌前将 $ \mathrm{p}\mathrm{H} $ 调为中性至弱碱性
C．在微生物艺术创作过程中，需要对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行灭菌处理
D．使用接种环接种时，取菌种前和接种后都要将接种环进行干热灭菌
应该在接种前对培养基进行高压蒸汽灭菌处理，若接种后再灭菌，大肠杆菌也会被杀死，无法得到作品， $ \mathrm{A} $ 错误；大肠杆菌适宜在中性至弱碱性环境中生长，所以培养基在灭菌前应将 $ \mathrm{p}\mathrm{H} $ 调为中性至弱碱性， $ \mathrm{B} $ 正确；对实验操作的空间、操作者的衣物和手应该进行消毒处理，而不是灭菌处理， $ \mathrm{C} $ 错误；使用接种环接种时，取菌种前和接种后都要将接种环进行灼烧灭菌，而不是干热灭菌， $ \mathrm{D} $ 错误。
5．为探究桔梅奇酵母对酸腐病（白地霉侵染引起的酸腐病会导致耙耙柑腐烂）的生物防治作用，研究人员在耙耙柑果实中部等距离刺两个孔，其中一孔接种 $ 0.1\mathrm{m}\mathrm{L} $ 桔梅奇酵母菌悬液和 $ 0.1\mathrm{m}\mathrm{L} $ 白地霉悬液，一段时间后统计果实发病率并测量白地霉菌丝生长情况，结果如下图。下列说法错误的是（ ）
图1 图2
A．耙耙柑为白地霉提供了水、无机盐、碳源和氮源等营养物质
B．另一个孔作为对照组的处理是接种等量无菌水和白地霉悬液
C．桔梅奇酵母可通过抑制白地霉菌丝的生长来降低酸腐病病害
D．桔梅奇酵母对其他水果的酸腐病有相似的防治效果
耙耙柑营养丰富，可为白地霉生长繁殖提供所需的水、无机盐、碳源、氮源等， $ \mathrm{A} $ 正确；实验设计应遵循对照与单一变量原则，故在耙耙柑果实中部等距离刺两个孔，其中一孔接种桔梅奇酵母菌悬液和白地霉悬液，另一孔应接种等量无菌水和白地霉悬液， $ \mathrm{B} $ 正确；本实验用到的材料是耙耙柑，所以无法推测桔梅奇酵母对其他水果的酸腐病的防治效果， $ \mathrm{D} $ 错误。
6．扩展青霉常见于腐烂的苹果中，其分泌的展青霉素 $ (\mathrm{P}\mathrm{A}\mathrm{T}) $ 是一种具有多种危害的毒素。为研究腐烂苹果中 $ \mathrm{P}\mathrm{A}\mathrm{T} $ 的分布，研究人员进行了如图1所示实验。
其中“病健交界处”为腐烂部位（病斑）与未腐烂部位的交界处，根据与病斑距离的不同将苹果划分为①~⑤五个部位。分别测定病斑直径为 $ 1\mathrm{c}\mathrm{m} $ 、 $ 2\mathrm{c}\mathrm{m} $ 、 $ 3\mathrm{c}\mathrm{m} $ 的苹果中①~⑤部位的 $ \mathrm{P}\mathrm{A}\mathrm{T} $ 含量，结果如图2所示。
回答下列问题：
（1） 该实验将扩展青霉菌种接种到苹果上，这里的苹果相当于微生物培养中的 。该实验的自变量是 。
（2） 由图2中信息 （填“能”或“不能”）得出病斑直径越大，苹果中距离病斑相同部位的 $ \mathrm{P}\mathrm{A}\mathrm{T} $ 含量越高这个结论。
（3） 由实验结果可知，苹果去除腐烂部位后也不建议食用，原因是 。
（4） 实验结束后，需要对实验所用器材进行 处理，目的是 。
（1） 培养基；与病斑的距离和病斑的直径
（2） 不能
（3） 未腐烂部位含有一定量的 $ \mathrm{P}\mathrm{A}\mathrm{T} $
（4） 灭菌；防止扩展青霉污染环境和感染操作者
（1） 培养基一般含有水、碳源、氮源、无机盐等，扩展青霉的生长和繁殖需要营养物质，该实验将扩展青霉菌种接种到苹果上，这里的苹果相当于微生物培养中的培养基。该实验的自变量是与病斑的距离和病斑的直径。
（2） 见题图解读。
（3） 由实验结果可知，②~⑤部位没有腐烂，也检测到了 $ \mathrm{P}\mathrm{A}\mathrm{T} $ ，故苹果去除腐烂部位后也不建议食用。
（4） 实验过程中的器材会接触菌种，所以实验结束后需要对所用到的器材进行灭菌处理，防止扩展青霉污染环境和感染操作者。