1．甲型 $ \mathrm{H}1\mathrm{N}1 $ 流感病毒表面的神经氨酸酶有4个抗原决定簇，一种抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体 $ (\mathrm{A}\mathrm{b}) $ 。由多种抗原决定簇刺激机体产生的多种抗体的总和称为多克隆抗体。如图为制备多克隆抗体（简称“多抗”）和单克隆抗体（简称“单抗”）的示意图。下列叙述正确的是（ ）
A．多抗由单一B细胞克隆产生，可以识别多种抗原表位
B．利用灭活病毒诱导法融合骨髓瘤细胞与B细胞时，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子会重新排布
C．筛选②需要将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔进行培养
D．甲型 $ \mathrm{H}1\mathrm{N}1 $ 流感病毒部分抗原结构改变后，会出现多抗失效而单抗有效的情况
答案：B
解析：由题意可知，一种抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由多种抗原决定簇刺激机体产生的多种抗体的总和称为多克隆抗体，因此多抗由多种 $ \mathrm{B} $ 细胞克隆产生， $ \mathrm{A} $ 错误；利用灭活病毒诱导法融合骨髓瘤细胞与 $ \mathrm{B} $ 细胞时，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子会重新排布，有利于细胞融合， $ \mathrm{B} $ 正确；筛选②需要将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔进行培养， $ \mathrm{C} $ 错误；甲型 $ \mathrm{H}1\mathrm{N}1 $ 流感病毒部分抗原结构改变后，会出现与该抗原对应的单抗失效，而多抗中含有针对其他抗原的抗体，可能仍有效， $ \mathrm{D} $ 错误。
2．猪细小病毒 $ (\mathrm{P}\mathrm{P}\mathrm{V}) $ 会导致猪患细小病毒传染病。 $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白参与 $ \mathrm{P}\mathrm{P}\mathrm{V} $ 的复制，猪感染 $ \mathrm{P}\mathrm{P}\mathrm{V} $ 后会产生抗 $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白抗体。研究发现，金黄色葡萄球菌A蛋白 $ (\mathrm{S}\mathrm{P}\mathrm{A}) $ 和 $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白均能与抗 $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白抗体特异性结合。为探究它们与抗体的结合位点是否相同，研究人员通过图1所示流程制备了抗 $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白的单克隆抗体，并将其分为 $ \mathrm{F}\mathrm{a}\mathrm{b} $ 和 $ \mathrm{F}\mathrm{c} $ 两部分，电泳后分别用 $ \mathrm{S}\mathrm{P}\mathrm{A} $ 和 $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白作探针进行杂交，结果如图2。下列说法正确的是（ ）
A．在小鼠体内培养杂交瘤细胞时应从小鼠脾脏中提取特异性抗体
B．步骤③获得的杂交瘤细胞中具有来自B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的两个细胞核
C．步骤④需经过克隆化培养和抗体检测获得产生抗 $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白抗体的杂交瘤细胞
D．分析图2可知， $ \mathrm{S}\mathrm{P}\mathrm{A} $ 和 $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白分别与抗 $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白抗体的 $ \mathrm{F}\mathrm{a}\mathrm{b} $ 、 $ \mathrm{F}\mathrm{c} $ 结合
答案：C
解析：在小鼠体内培养杂交瘤细胞是将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖，需要从小鼠腹水中提取特异性抗体，而不是从脾脏中提取， $ \mathrm{A} $ 错误；步骤③获得的杂交瘤细胞是由 $ \mathrm{B} $ 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的，具有一个细胞核，该细胞核融合了 $ \mathrm{B} $ 淋巴细胞和骨髓瘤细胞的核物质， $ \mathrm{B} $ 错误；步骤④需经过克隆化培养和抗体检测，从而获得能稳定产生抗 $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白抗体的杂交瘤细胞， $ \mathrm{C} $ 正确；从图2可以看出， $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白与抗 $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白抗体的 $ \mathrm{F}\mathrm{a}\mathrm{b} $ 部分结合， $ \mathrm{S}\mathrm{P}\mathrm{A} $ 与抗 $ \mathrm{N}\mathrm{S}1 $ 蛋白抗体的 $ \mathrm{F}\mathrm{c} $ 部分结合， $ \mathrm{D} $ 错误。
3．双特异性抗体具有两个不同的抗原结合位点，能够同时结合两种不同的抗原。前列腺癌细胞表面有高表达的前列腺特异性膜抗原 $ (\mathrm{P}\mathrm{S}\mathrm{M}\mathrm{A}) $ ， $ \mathrm{C}\mathrm{D}28 $ 是 $ \mathrm{T} $ 细胞表面受体， $ \mathrm{T} $ 细胞的有效激活依赖两个条件：一是 $ \mathrm{C}\mathrm{D}28 $ 接收激活信号，二是实现癌细胞与 $ \mathrm{T} $ 细胞的聚集。图甲为科研人员尝试构建产生 $ \mathrm{P}\mathrm{S}\mathrm{M}\mathrm{A} $ 和 $ \mathrm{C}\mathrm{D}28 $ 的特异性抗体的杂交瘤细胞；图乙为双特异性抗体 $ (\mathrm{P}\mathrm{S}\mathrm{M}\mathrm{A}×\mathrm{C}\mathrm{D}28) $ 的结构及作用机理图。
甲 乙
（1） 相较于植物体细胞杂交技术中所用的诱导原生质体融合的方法，图甲中所示的诱导融合特有的方法是 法。
（2） 为得到杂交瘤细胞需进行两次筛选。
① 第一次筛选目的是得到杂交瘤细胞。核苷酸合成有两个途径，如图丙所示。骨髓瘤细胞只能利用全合成途径进行无限增殖；B淋巴细胞两种途径都能进行。现用加入 $ \mathrm{H} $ 、A、 $ \mathrm{T} $ 三种物质的“ $ \mathrm{H}\mathrm{A}\mathrm{T} $ 培养基”来筛选未融合的或两两融合的细胞时，其中 （选填简称“瘤细胞”“B细胞”“瘤瘤细胞”“ $ \mathrm{B}\mathrm{B} $ 细胞”或“B瘤细胞”）会因无法进行图中途径而在 $ \mathrm{H}\mathrm{A}\mathrm{T} $ 培养基上不能增殖。杂交瘤细胞在“ $ \mathrm{H}\mathrm{A}\mathrm{T} $ 培养基”上可以通过 途径合成核酸。
丙
② 将第一次筛选获得的细胞进行 和 ，经过多次筛选，就可以获得 ，该细胞具有 的特点。
（3） $ \mathrm{P}\mathrm{S}\mathrm{M}\mathrm{A} $ 和 $ \mathrm{C}\mathrm{D}28 $ 的双特异性抗体 $ (\mathrm{P}\mathrm{S}\mathrm{M}\mathrm{A}×\mathrm{C}\mathrm{D}28) $ 通过与 $ \mathrm{C}\mathrm{D}28 $ 结合，为 $ \mathrm{T} $ 细胞激活提供了刺激信号。结合题干及图分析，该双特异性抗体协助杀伤癌细胞的机理是 。
答案：（1） 灭活病毒诱导
（2） ① 瘤细胞、瘤瘤细胞；补救合成
② 克隆化培养；抗体检测；能产生所需抗体的杂交瘤细胞；既能迅速大量增殖，又能产生特定抗体
（3） 既能使 $ \mathrm{C}\mathrm{D}28 $ 接收激活信号，又实现了癌细胞与 $ \mathrm{T} $ 细胞的聚集，最终激活 $ \mathrm{T} $ 细胞杀伤癌细胞
解析：（1） 相较于诱导植物细胞融合，图甲动物细胞融合所特有的诱导方法是灭活病毒诱导法。
（2） ① 已知物质 $ \mathrm{A} $ 可以阻断其中的全合成途径，骨髓瘤细胞不能进行补救合成途径，所以用添加 $ \mathrm{H} $ 、 $ \mathrm{A} $ 、 $ \mathrm{T} $ 三种物质的培养基来筛选时，瘤细胞和瘤瘤细胞两种途径都无法进行，所以无法合成核苷酸，从而无法在 $ \mathrm{H}\mathrm{A}\mathrm{T} $ 培养基上增殖。杂交瘤细胞（由 $ \mathrm{B} $ 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合产生）的全合成途径虽然被物质 $ \mathrm{A} $ 阻断，但由于其中的 $ \mathrm{B} $ 淋巴细胞保留了能利用 $ \mathrm{H} $ 、 $ \mathrm{T} $ 物质合成核苷酸的补救合成途径，故可以继续增殖。
② 将第一次筛选获得的细胞进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选，就可以获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞具有既能迅速大量增殖，又能产生特定抗体的特点。
（3） 双特异性抗体 $ \mathrm{P}\mathrm{S}\mathrm{M}\mathrm{A}×\mathrm{C}\mathrm{D}28 $ 协助杀伤癌细胞的机理是双特异性抗体 $ \mathrm{P}\mathrm{S}\mathrm{M}\mathrm{A}×\mathrm{C}\mathrm{D}28 $ 既能结合 $ \mathrm{P}\mathrm{S}\mathrm{M}\mathrm{A} $ ，使 $ \mathrm{C}\mathrm{D}28 $ 接收激活信号，又能结合 $ \mathrm{C}\mathrm{D}28 $ ，实现了癌细胞与 $ \mathrm{T} $ 细胞的聚集，从而有效激活 $ \mathrm{T} $ 细胞杀伤癌细胞。
4．黄曲霉毒素（AFB）是黄曲霉（一种真菌）产生的具有极强致癌力的代谢产物。为准确检测食品中残留的 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ ，科研人员开展了下列研究。
（1） 科研人员利用小鼠制备抗 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 的单克隆抗体 $ (\mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 单抗 $ ) $ ，过程如图1。杂交瘤细胞需进行步骤Ⅱ 和Ⅲ 检测，经过多次筛选。
（2） 食品中的有害残留毒素还可能有橘霉素 $ (\mathrm{C}\mathrm{I}\mathrm{T}) $ 、伏马菌素 $ {\mathrm{B}}_{1}({\mathrm{F}\mathrm{B}}_{1}) $ 。若想确认上述流程获得的 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 单抗具有极强的特异性，应补充的检测和结果是 。
（3） 科研人员拟将 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 单抗固定在一种新材料上，制备“检测探针”。已知材料 $ \mathrm{M} $ 在稳定性、发光性能等方面有明显优势，但它很难与抗体结合；物质 $ \mathrm{P} $ 可以提高材料 $ \mathrm{M} $ 对抗体的亲和力。制备检测探针的流程如图2，探针发光性能与物质 $ \mathrm{P} $ 的浓度关系如图3。
依据图3结果，科研人员选择物质 $ \mathrm{P} $ 的浓度为 $ 0.8\mathrm{m}\mathrm{g}/\mathrm{m}\mathrm{L} $ 作为生产检测探针的条件，原因是在该浓度下，探针发光性能与更高浓度时 ，而该浓度可节省成本。
（4） 科研人员制备定量检测 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 的免疫试纸，如图4。测定样品前，先配制一系列不同浓度的 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 标准溶液，分别与等量“ $ \mathrm{M}\mathrm{P}-\mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 单抗探针”混合均匀，滴至加样处。
科研人员测定了 $ \mathrm{T} $ 线、C线的发光值，从而绘制出特定范围 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 浓度的线性标准曲线（如图5），其中 （选填字母）可作为后续检测食品中是否含有 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 的参照曲线。
答案：（1） 克隆化培养；抗体
（2） 用 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 单抗分别与橘霉素、伏马菌素 $ {\mathrm{B}}_{1} $ 进行抗原—抗体杂交，结果为阴性
（3） 差异很小（或无显著差异）
（4） D
解析：（1） 图1为利用小鼠制备抗 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 的单克隆抗体的过程，其中步骤Ⅰ为诱导细胞融合并筛选得到杂交瘤细胞，需进一步通过步骤Ⅱ克隆化培养和步骤Ⅲ抗体检测，经过多次筛选得到能产生 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 单抗的杂交瘤细胞。
（2） 若想确认上述流程获得的 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 单抗具有极强的特异性，可以让 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 单抗与食品中可能残留的其他有害残留毒素如橘霉素 $ (\mathrm{C}\mathrm{I}\mathrm{T}) $ 、伏马菌素 $ {\mathrm{B}}_{1}({\mathrm{F}\mathrm{B}}_{1}) $ 进行抗原—抗体杂交，结果为阴性，则可确认 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 单抗具有极强的特异性。
（3） 图3结果表明，在物质 $ \mathrm{P} $ 浓度为 $ 0.8\mathrm{m}\mathrm{g}/\mathrm{m}\mathrm{L} $ 时，探针发光性能与更高浓度时差异很小，同时可节省成本，因此科研人员选择该浓度 $ (0.8\mathrm{m}\mathrm{g}/\mathrm{m}\mathrm{L}) $ 作为生产检测探针的条件。
（4） 根据科研人员制备免疫试纸和检测 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 的原理（用一系列不同浓度的 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 标准溶液分别与等量“ $ \mathrm{M}\mathrm{P}-\mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 单抗探针”混合）可推知随着 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 浓度增加，与之结合的探针增加， $ \mathrm{T} $ 发光值减小， $ \mathrm{C} $ 发光值增大，即 $ \mathrm{T}/\mathrm{C} $ 发光值比下降，绘制出特定范围 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 浓度的线性标准曲线 $ \mathrm{D} $ 可作为后续检测食品中是否含有 $ \mathrm{A}\mathrm{F}\mathrm{B} $ 的参照曲线。