1．科学家尝试将某种濒危猫科动物的体细胞核移植到去核的家猫卵母细胞中形成重构胚，以实现濒危猫科动物的克隆繁殖。下列说法错误的是（ ）
A．家猫的卵母细胞需要在体外培养至 $ \mathrm{M}Ⅱ $ 期
B．可通过电融合法使濒危猫科动物的细胞与去核的家猫卵母细胞融合
C．通过该技术可对濒危猫科动物进行 $ 100\% $ 复制，有望拯救部分濒危动物
D．重构胚进行胚胎移植前需用物理或化学方法激活，使其完成细胞分裂和发育进程
体细胞核移植过程中卵母细胞需在体外培养至 $ \mathrm{M}Ⅱ $ 期， $ \mathrm{A} $ 正确；可用电融合法诱导动物细胞融合，使供体细胞与去核卵母细胞融合， $ \mathrm{B} $ 正确；克隆个体的核 $ \mathrm{D}\mathrm{N}\mathrm{A} $ 来自供体细胞，但细胞质 $ \mathrm{D}\mathrm{N}\mathrm{A}( $ 如线粒体 $ \mathrm{D}\mathrm{N}\mathrm{A}) $ 部分来自去核卵母细胞，且表型受环境影响，无法 $ 100\% $ 复制， $ \mathrm{C} $ 错误；胚胎移植前，重构胚需要激活以启动细胞分裂和发育进程， $ \mathrm{D} $ 正确。
2．中国科学院团队对雌性猕猴进行克隆，成功获得“中中”和“华华”两姐妹，突破了现有技术无法用体细胞克隆非人灵长类动物的难题。如图为“中中”和“华华”培育的流程，相关叙述错误的是（ ）
A．去除卵子的“核”，实质是去除纺锤体—染色体复合物
B．②过程是动物胚胎的体外培养过程，需无菌、无毒环境
C．“中中”“华华”的线粒体 $ \mathrm{D}\mathrm{N}\mathrm{A} $ 完全来自提供卵子的母猴
D．“中中”“华华”的性别由成纤维细胞的遗传物质决定
由图可知，“中中”和“华华”是由去核卵子和体外培养的成纤维细胞融合后发育而成的，故“中中”和“华华”的线粒体 $ \mathrm{D}\mathrm{N}\mathrm{A} $ 来自卵子和成纤维细胞， $ \mathrm{C} $ 错误。
3．近年来，野生动物郊狼的数量不断减少、濒临灭绝，采集其精子或卵子开展常规辅助生殖较为困难。种间体细胞核移植 $ (\mathrm{i}\mathrm{S}\mathrm{C}\mathrm{N}\mathrm{T}) $ 技术在野生郊狼遗传资源的保护中发挥了重要作用，具体流程如图。下列叙述错误的是（ ）
A．由该流程可得出郊狼体细胞的细胞核和重组细胞都具有全能性
B．实际操作中通常将供体细胞注入去核的卵母细胞，既操作简便，又能减小对细胞的损伤
C．郊狼乙的遗传物质与代孕家犬完全不同，与郊狼甲的完全相同
D．与胚胎细胞核移植技术相比， $ \mathrm{i}\mathrm{S}\mathrm{C}\mathrm{N}\mathrm{T} $ 技术成功的难度更大
由郊狼甲的体细胞核移植克隆出郊狼乙，可得出郊狼体细胞的细胞核具有全能性，郊狼乙是由重组细胞发育而来的，可得出重组细胞也具有全能性， $ \mathrm{A} $ 正确；在实际操作中，通常将供体细胞注入去核的卵母细胞，这种方法既操作简便，又能减小对细胞的损伤， $ \mathrm{B} $ 正确；郊狼乙的遗传物质中细胞质遗传物质来自家犬和郊狼甲，细胞核遗传物质来自郊狼甲，因此郊狼乙的遗传物质与代孕家犬并非完全不同，其核遗传物质与郊狼甲的相同， $ \mathrm{C} $ 错误； $ \mathrm{i}\mathrm{S}\mathrm{C}\mathrm{N}\mathrm{T} $ 技术使用的是体细胞，体细胞分化程度高，所以与胚胎细胞核移植技术相比， $ \mathrm{i}\mathrm{S}\mathrm{C}\mathrm{N}\mathrm{T} $ 技术成功的难度更大， $ \mathrm{D} $ 正确。
4．体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生以及其他领域有着广阔的应用前景。下列关于体细胞核移植技术的应用前景及存在问题的叙述，错误的是（ ）
A．利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产珍贵的医用蛋白
B．以患者细胞作为供体细胞培育的人核移植胚胎干细胞，经诱导形成的组织、器官等移植给患者，可避免免疫排斥反应
C．体细胞核移植技术发展到今天，已经相当成熟，成功率较高
D．有研究者指出，绝大多数克隆动物存在健康问题，如体型过大、脏器缺陷、免疫失调等
尽管通过体细胞核移植技术已经获得了多种克隆动物，但该技术的成功率仍然非常低，各个技术环节也有待进一步改进， $ \mathrm{C} $ 错误。
1．体细胞核移植技术为建立人类疾病的动物模型、研究疾病机理带来光明前景。如图表示体细胞核移植技术的过程，下列说法错误的是（ ）
A．上述过程利用了动物细胞核移植、动物细胞培养等技术
B．细胞A常用处于减数分裂Ⅱ中期的次级卵母细胞
C．过程②在培养基中加入的动物血清含有激发细胞全能性表达的物质
D．该技术有望解决供体器官的短缺和器官移植出现的免疫排斥反应问题
据图可知，该过程利用了动物细胞核移植、动物细胞培养等技术， $ \mathrm{A} $ 正确；细胞 $ \mathrm{A} $ 常用处于减数分裂Ⅱ中期的次级卵母细胞，原因是其细胞质中含有激发细胞核全能性表达的物质， $ \mathrm{B} $ 正确；过程②表示重组细胞发育成囊胚，激发细胞核全能性表达的是细胞 $ \mathrm{A} $ 细胞质中的物质， $ \mathrm{C} $ 错误；图示中的胚胎干细胞的核遗传物质来源于患者提供的体细胞，将由此形成的器官移植给患者可以避免免疫排斥反应，故该技术有望解决供体器官的短缺和器官移植出现的免疫排斥反应问题， $ \mathrm{D} $ 正确。
2．二次克隆是指通过剖宫产获取克隆胎儿细胞进行的再次动物克隆，可避免供核细胞长期体外培养所造成的老化现象。研究发现，采用二次克隆来制备转基因克隆动物，无论是在重构胚的融合率、发育率还是移植受体妊娠率方面均明显高于传统的体细胞核移植。如图为二次克隆的简易流程图，下列说法错误的是（ ）
A．两次克隆的去核过程中均是去除纺锤体—染色体复合物
B．制备供体细胞前可用胰蛋白酶消化胎羊细胞间的蛋白质
C．胎羊C细胞中线粒体 $ \mathrm{D}\mathrm{N}\mathrm{A} $ 来源于乙羊和胎羊B
D．第二次克隆的重构胚融合率高是因为胎羊细胞的分化程度高
将采集的卵母细胞在体外培养到 $ \mathrm{M}Ⅱ $ 期时通过显微操作去核，此时去除的是纺锤体—染色体复合物， $ \mathrm{A} $ 正确；制备供体细胞前可用胰蛋白酶消化动物细胞之间的蛋白质，从而得到单个细胞， $ \mathrm{B} $ 正确；胎羊 $ \mathrm{C} $ 的形成是将胎羊 $ \mathrm{B} $ 的体细胞注射到乙羊去核的卵母细胞中，因此胎羊 $ \mathrm{C} $ 细胞中线粒体 $ \mathrm{D}\mathrm{N}\mathrm{A} $ 来源于乙羊和胎羊 $ \mathrm{B} $ ， $ \mathrm{C} $ 正确；第二次克隆的重构胚融合成功率高是因为胎羊细胞的分化程度低，细胞核的全能性相对容易表达， $ \mathrm{D} $ 错误。
3．现代社会压力使人们的作息很难严格遵循体内的生物钟。频繁地加班、熬夜等导致人的生物钟紊乱，最终出现失眠、日间嗜睡等问题。通过实验，我国科研团队成功获得了5只 $ BMAL1 $ 基因敲除的克隆猴，极大地推动了生物钟紊乱相关问题的研究。培育克隆猴的步骤如图所示，回答下列问题：
（1） 哺乳动物利用胚胎细胞进行核移植较体细胞更易成功，原因是 。
（2） 对卵母细胞去核常采用的方法是 ，克隆猴的性状与 （填“A”或“B”）猴的性状相似度更高。与供体猴相比，克隆猴体细胞染色体数目 （填“加倍”“不变”或“减半”）。
（3） 在将体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞中前，必须先去除受体卵母细胞的细胞核，原因是 。
（4） 为了验证 $ BMAL1 $ 基因与昼夜节律有关，科学家进行了相关实验，如表所示。
组别 | 实验个体 |
对照组 | ? |
实验组 | 5只 $ BMAL1 $ 基因敲除的克隆猴 |
① 表中对照组的实验个体是 。
② 结果显示，与对照组相比，实验组猴的神经内分泌激素褪黑素分泌减少；与睡眠剥夺、抑郁症以及衰老等相关的基因表达 （填“增强”或“减弱”）；不再按照24小时的周期活动，在夜间活动明显增多。这说明 $ BMAL1 $ 基因与昼夜节律有关。
（1） 胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易
（2） 显微操作法；B；不变
（3） 使克隆后代的核遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞
（4） ① 5只与克隆猴生理状态相似的未敲除 $ BMAL1 $ 基因的同种猴
② 增强
（1） 与动物体细胞相比，胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，故胚胎细胞核移植更易成功。
（2） 目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。图中克隆猴的细胞核基因来自 $ \mathrm{B} $ 猴的体细胞，因此克隆猴的性状与 $ \mathrm{B} $ 猴的性状相似度更高，其体细胞染色体数目与供体猴 $ (\mathrm{B} $ 猴 $ ) $ 相同。
（3） 在将体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞中前，必须先去除受体卵母细胞的细胞核，以使克隆后代的核遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞。
（4） 从表中可知，对照组应该选择数量相同（5只）、生理状态与克隆猴相似的未敲除 $ BMAL1 $ 基因的同种猴。实验结果表明 $ BMAL1 $ 基因与昼夜节律有关，因此，与对照组相比，敲除 $ BMAL1 $ 基因的克隆猴（实验组猴）的神经内分泌激素褪黑素分泌减少；与睡眠剥夺、抑郁症以及衰老等相关的基因表达增强；不再按照24小时的周期活动，在夜间活动明显增多。